29 de Jun, 2019 . El método fue desarrollado con el sistema MACS de Miltenyi Biotec, que utiliza nanopartículas y columnas superparamagnéticas. Las nanopartículas superparamagnéticas son del orden de 100 nm. Se utilizan para etiquetar las celdas seleccionadas para capturarlas dentro de la columna. La columna se coloca entre los imanes permanentes, de modo que cuando el complejo magnético de partículas y células pasa a través de ella, las células etiquetadas se pueden capturar. La columna consta de lana de acero que aumenta el gradiente del campo magnético para maximizar la eficiencia de separación cuando la columna se coloca entre los imanes permanentes.
La clasificación de células activadas magnéticamente es un método comúnmente utilizado en áreas como la inmunología, la investigación del cáncer, la neurociencia y la investigación con células madre. Miltenyi vende microperlas que son nanopartículas magnéticas conjugadas con anticuerpos que pueden usarse para atacar células específicas.
El método MACS permite que las células se separen mediante el uso de nanopartículas magnéticas recubiertas con anticuerpos contra un antígeno de superficie particular. Esto hace que las células que expresan este antígeno se adhieran a las nanopartículas magnéticas. Después de incubar las perlas y las células, la solución se transfiere a una columna en un campo magnético fuerte. En este paso, las células unidas a las nanopartículas (que expresan el antígeno) permanecen en la columna, mientras que otras células (que no expresan el antígeno) fluyen a través de ellas. Con este método, las células se pueden separar de manera positiva o negativa con respecto al antígeno (s) en particular.
Con la selección positiva, las células que expresan el (los) antígeno (s) de interés, que se unieron a la columna magnética, se lavan en un recipiente separado, después de retirar la columna del campo magnético. Este método es útil para el aislamiento de un tipo de célula particular, por ejemplo, linfocitos CD4.
Con selección negativa, el anticuerpo usado está contra el antígeno (s) de superficie que se sabe que están presentes en las células que no son de interés. Después de la administración de la solución de células / nanopartículas magnéticas en la columna, las células que expresan estos antígenos se unen a la columna y se recoge la fracción que atraviesa, ya que casi no contiene células con estos antígenos no deseados.
Las nanopartículas magnéticas conjugadas con un anticuerpo contra un antígeno de interés no siempre están disponibles, pero hay una manera de evitarlo. Dado que los anticuerpos conjugados con fluoróforos son mucho más frecuentes, es posible usar nanopartículas magnéticas recubiertas con anticuerpos antifluorocromos. Se incuban con los anticuerpos marcados con fluorescencia contra el antígeno de interés y, por lo tanto, pueden servir para la separación de células con respecto al antígeno. [Cita requerida]
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