Objetivo

Establecer un sistema de selección no invasivo de embriones humanos con un alto potencial de implantación antes de la transferencia.

Diseño

Estudio de cohorte.

Ajuste

Clínicas independientes de FIV.

Paciente (s)

Ciento sesenta y cuatro pacientes, con 791 embriones fertilizados, revisados y registrados.

Intervención (es)

Los embriones se dividieron en nueve grupos según el número de células que contenían y la extensión de su fragmentación durante la primera y segunda división. Examinamos los efectos del patrón de división celular y el tiempo de división de los embriones en el desarrollo posterior in vitro e in vivo utilizando una incubadora de lapso de tiempo.

Las principales medidas)

Tasas de formación de blastocistos, formación de blastocistos de alta calidad y embarazo.

Resultado (s)

Las tasas de embriones se convirtieron en blastocistos y blastocistos en los que tanto la masa celular interna como los grados de trofectodermo se calificaron con B o más altos (blastocistos de buena calidad) fueron altos en los grupos que formaron dos células durante la primera división y cuatro células durante la segunda división. Independientemente de la presencia o ausencia de fragmentación. En estos grupos, los tiempos de primera y segunda división (25.90 y 37.88 horas después del cultivo, respectivamente) de embriones desarrollados en blastocitos de buena calidad fueron significativamente más cortos que los de otros embriones. Aunque la selección de embriones basada en los tiempos de primera y segunda división no afectó las tasas de embarazo después de la transferencia en el día 2 o 3 del cultivo, mejoró las tasas de embarazo después de la transferencia de blastocitos en el día 5.

Conclusión (es)

La transferencia de blastocistos derivados de embriones que completaron la primera y la segunda divisiones dentro de las 25.90 y 37.88 horas después del cultivo, respectivamente, produce altas tasas de embarazo.

Todos los participantes del estudio dieron su consentimiento informado, y el diseño del estudio fue aprobado por las juntas de revisión de ética apropiadas. La estimulación ovárica se realizó usando el acetato de buserelina análogo de GnRH (Fuji Pharmaceutical) y el protocolo corto o largo junto con la estimulación con FSH y hMG (ASUKA Pharmaceutical). Gonadotropina coriónica humana (Fuji Pharmaceutical) o leuprolide se administraron cuando el diámetro máximo de dos o más folículos alcanzó 18 mm. Los complejos de cúmulos y ovocitos se recuperaron mediante aspiración del folículo transvaginal guiada por ultrasonido aproximadamente 36 horas después de la inyección de hCG. Los ovocitos se desnudaron mediante pipeteo en una solución de hialuronidasa (ORIGIO). De abril a diciembre de 2014, examinamos el resultado de 164 ciclos de recuperación. La edad media (± DE) de los pacientes en los ciclos de recuperación fue de 37,6 ± 4,1 años. La fertilización de los ovocitos se realizó mediante FIV convencional (33 ciclos de recuperación), inyección intracitoplásmica de espermatozoides (ICSI) (88 ciclos de recuperación) o ciclo dividido (43 ciclos de recuperación) utilizando técnicas estándar. Para el ciclo dividido, los ovocitos se asignaron al azar a FIV convencional o ICSI. Los embriones de FIV convencionales se cargaron en el EmbryoScope de 4 a 5 horas después de la inseminación. Los embriones ICSI se cultivaron en el EmbryoScope inmediatamente después de la microinyección. Excepto en el caso de la ET, los embriones se cultivaron en medio de un paso (NAKA Medical) cubierto con aceite mineral estéril a 37 ° C con 5% de CO2, 5% de O2 y 90% de N2 durante un máximo de 6 días y luego se evaluaron para Patrones tempranos de escisión y formación de blastocistos. Los blastocistos en los que tanto la masa celular interna como los grados de trofectodermo se calificaron como B o más altos se consideraron blastocistos de buena calidad ( 11 x 11 Gardner, DK, Lane, M., Stevens, J., Schlenker, T. y Schoolcraft, WB Blastocyst score afecta la implantación y el resultado del embarazo: hacia una única transferencia de blastocistos. Fertil Steril . 2000 ; 73 : 11551158

Resumen | Texto completo | Texto Completo PDF | PubMed | Scopus (616) | Google Académico Ver todas las referencias ) (11) . La transferencia de un solo embrión fresco se realizó a los 2 (21 ciclos de recuperación), 3 (12 ciclos de recuperación) o 5 (14 ciclos de recuperación) días después de la recuperación de ovocitos. El mejor embrión individual se seleccionó mediante evaluación morfológica para la transferencia fresca, y el resto se crioconservó. La crioconservación de los embriones utilizando un Cryotop (Kitazato) se realizó mediante métodos establecidos ( 12 x 12 Kuwayama, M., Vajta, G., Kato, O., y Leibo, SP Método de vitrificación altamente eficiente para la crioconservación de ovocitos humanos. Reprod Biomed En línea . 2005 ; 11 : 300308

Resumen | Texto Completo PDF | PubMed | Scopus (761) | Google Scholar Ver todas las referencias , 13 x 13 Kuwayama, M. Vitrificación altamente eficiente para la crioconservación de ovocitos y embriones humanos: el método Cryotop. Teriogenología . 2007 ; 67 : 7380

Resumen | Texto completo | Texto Completo PDF | PubMed | Scopus (435) | Google Scholar Ver todas las referencias ). Después de la crioconservación, se realizó una única transferencia de blastocistos crioconservados durante los ciclos de terapia de reemplazo hormonal (60 ciclos de recuperación). Las transferencias de embriones también se realizaron con embriones en etapa de división que se habían crioconservado el día 2 o 3 (tres ciclos de recuperación). Las tasas de embarazo clínico se determinaron según la presencia de un saco gestacional como se visualizó por ultrasonido a las 3 semanas después de la TE.

En el experimento 1, para examinar los efectos de los patrones de primera división en el desarrollo embrionario subsiguiente, comparamos las tasas de formación de blastocistos y blastocistos de buena calidad en los grupos A, B y C.

En el experimento 2, para examinar los efectos de los patrones de segunda división en el desarrollo embrionario subsiguiente, comparamos las tasas de formación de blastocistos y blastocistos de buena calidad en los grupos D, E, F, G, H y I.

En el experimento 3, para examinar los efectos de los patrones de segunda división en el embarazo clínico, los embriones en los grupos D, E y H se transfirieron los días 23 o 5.

En el experimento 4, para examinar los efectos de los tiempos de división celular en la formación de blastocistos de embriones en los grupos D, E y H, se compararon los tiempos de primera y segunda división de los embriones que se convirtieron en blastocistos de buena calidad y otros blastocistos con los de Embriones que no se convirtieron en blastocistos. Los períodos de tiempo comenzaron en el momento de la inseminación e inyección para los embriones convencionales de FIV e ICSI, respectivamente.

En el experimento 5, examinamos los efectos de los tiempos de división celular en el embarazo clínico en los grupos D, E y H. Los embriones que completaron la primera y la segunda divisiones dentro de las 25.90 y 37.88 horas después del cultivo, respectivamente (embriones escindidos tempranamente), se transfirieron los días 2 3 o 5, y las tasas de embarazo se compararon con las obtenidas mediante la transferencia de los otros embriones.